无菌测试必须在严格的无菌条件下进行。斯泰西Orley,韦翰实验室,描述了过程,以确保产品和设备含污染物
不育性测试是药品和医疗器械的监管要求,评估如果货物是免费的从污染微生物。测试执行后接受绝育手术(辐射、化学消毒或热冲销)。不可能测试整个批量生产,因此,无菌试验是归类为统计结果;只有一部分的批量测试提供保证剩下的批处理是无菌的。
美国药典(USP < 71 >),欧洲药典(EP 2.6.1)和日本药典(JP 4.06),提供指导的最小数量的容器必须测试根据产品类型,填写大小和批量大小,必须考虑在执行无菌试验。
无菌测试必须在严格的无菌条件下进行。通常在一个隔离器或手套箱。的环境隔离器或手套箱位于理想情况下应该HEPA-filtered洁净室污染减少潜在的背景。这将提供一个GMP级8 D环境或ISO 14644 - 1类。1
有两种类型的压力差异在隔离器或手套箱用于测试。这些设计可以在正压下运行,这是常规选择不育测试这个产品提供最佳保护。或者,他们可以设计为在负压下工作,为操作员提供最大的保护。
无论隔离系统、设备设计有适当数量的空气通过内置的HEPA过滤器与持续的气流变化。这些过滤器去除粒子至少0.3μm大小的99.97%。校准检查应每隔六个月,以确保HEPA过滤器操作有效,它必须满足所需的详细规格颗粒计数在ISO 14644 - 1。2
无菌隔离器设计以这样一种方式,允许样本,设备和耗材托盘装上合适的架子和基地,这将使最小的闭塞的表面。
验证工作,之前进行,将决定项目的最大数量,可以加载到隔离器室。至关重要,消除地对地接触尽可能多的使项目加载净化。
所选的关头方法应该接触到所有的外表面区域项目加载。这确保净化过程可以有效消毒所有接触区域和消除任何潜在的微生物室内可能是运输的时候加载。封锁的常见方法之一是一个杀孢子的35%过氧化氢等气体蒸汽蒸汽(HPV),就是能破坏细菌/真菌营养细胞和细菌和真菌孢子。
气体处理周期规范用于常规测试是验证使用生物指标(BI)一式三份。这些BIs包含孢子形成的有机体,应该实现6-log减少使用孢子人口106;这将提供的证据表明,生物出现在BI之前吹嘘成功消除在气体处理周期。
细菌孢子最耐人乳头状瘤病毒Geobacillus stearothermophilus验证过程,常用的气体处理周期。这不是唯一的孢子形成的有机体,可以用作它取决于佳代理使用。
BIs的位置和数量应选择代表一个面积广阔的内部室和放置在目标地区天然气可能不那么容易。化学指标(CIs)也可以用于验证与BIs如果需要一起工作在相同的目标地区。蒸汽分布应该成功接触到的区域选择和销毁任何生物出现在国际清算银行以及实现足够的颜色变化对CIs。
需要确保requalification进行重复初始气体处理周期的验证工作提供证据表明,气体处理周期通常是仍在有效使用。消毒过程的有效性应每年至少,或者当修改周期或负载模式已经发生了变化。
手套箱的完整性或隔离器应该定期检查,进行压力衰减或泄漏率测试,以确定是否存在泄漏隔离器内的环境。泄漏率测试应满足所需的指定的限制取决于隔离器的类或手套箱;根据指南详细在ISO 14644 - 7, ISO 10648 - 2。3 - 4这些指导方针应该被纳入任何实验室的内部程序执行无菌测试。
压力衰减测试后还应进行常规或非常规维修工作进行了以确保完整性没有妥协。
问题可能出现的压力衰减测试失败时所观察到的很多东西,包括违反隔离器手套或诉讼/套系统;违反隔离器的树冠;海豹可能松了基地的树冠的如果是一个灵活的电影设计;一般穿西装(取决于使用);HEPA过滤器的问题;充分或操作员不关闭阀门。
清洁和维护程序以及定期设备检查是必不可少的
隔离器或手套箱应彻底清洗间隔定义组成的彻底深层清洁所有内部表面隔离器/手套箱室使用消毒剂进行验证。
清洗过程应由移动内部货架和基础托盘,确保所有表面都可以接触使用的消毒剂。这将消除内部表面上的任何化学残留物存在可能为微生物提供了一个盾牌,防止他们被关头取消周期。使用验证隔离器也应该清洗消毒剂每次使用结束时删除任何样品残留的痕迹或可能污染可能发生在测试会话。
每天使用隔离器/手套箱要求目视检查和必须注意任何损害(穿孔针、磨损)每次使用之前和之后。5受损区域的西装或袖子可以修补,然而,它是自由裁量权的实验室有多少补丁可以根据风险评估。修补的选择是完全改变它;一个压力衰减,验证气体处理周期和封锁测试应该执行,确保完整性是完好无损。
可以消除微生物污染水平的外部表面擦拭表面区域的所有项目验证消毒剂和确保它是接触的最小接触时间进行验证。一旦表面区域使用的消毒剂干燥,样品,测试所需的设备和耗材可以加载到隔离器或手套箱通过转让舱口或加料门。
每个无菌试验会话期间微生物监测是至关重要的。环境监控整个测试会话使用解决板,板接触,活跃的空气样本,拭子和手指动作(在生产过程中,经常使用)。以前每个样本类型的位置将被验证,和选择的地区代表的工作区域进行测试。监测位置的细节应该清楚详细的设备的标准操作程序。
媒体经常用于微生物监控是胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)监控总可行的计数,Sabouraud葡萄糖琼脂(SAB或SDA)监测真菌计数和胰蛋白胨大豆琼脂卵磷脂和渐变(TLT),可以支持增长的细菌、酵母和霉菌。中用于测试应该进行生育测试使用前确保批琼脂的增长可以支持使用所需的药典的有机体。从监测获得的信息将决定如果隔离器环境操作。
至关重要的是,测试环境的完整性维护最高标准,确保不存在潜在风险的一个无效的无菌试验的结果。清洗和维护程序,以及定期设备检查,确保隔离器完整性的关键是完好无损。
微生物监测还需要确保环境操作如预期在每个测试会话。
最后,从获得的数据控制,环境监测,维护检查和气体处理周期可用于实验室调查来确定如果一个无菌试验无效或失败。因此,所有程序必须遵循和清楚地记录的可追溯性。
