预防、控制和根除用于医疗器械生产的洁净室中的污染是灭菌服务提供商Isotron最近举行的GMP研讨会的主题
在医疗器械生产中，低生物负荷水平是关键。生物负荷控制及其如何影响产品灭菌是灭菌服务提供商Isotron最近GMP研讨会的主题。苏珊·伯克斯在现场报道。
Isotron组织的研讨会针对一系列洁净室用户，从医疗设备制造商到合同包装商和组件供应商。会议的主题是良好生产规范(GMP)，演讲内容涵盖了洁净室操作的基本原则、规定、生物负荷和内毒素的测试、环境监测的原因和要求、如何处理“超出规格”的结果，以及一些重要的注意事项。演讲嘉宾具有长期的洁净室使用经验。
洁净室经常受到几个被广泛贴上污染标签的敌人的围攻。在大多数情况下，污染物是肉眼看不见的，这使得监测它们的存在成为一项困难但至关重要的任务。随着监管机构从规定性的监管措施转向基于风险的方法，与这个敌人的战斗也受到不断变化的目标，风险分析和证明的负担落在了无尘室运营商的肩上。
洁净室咨询公司High Edge Consulting董事总经理、微生物学专家Peter Rose概述了医疗器械生产的基本原则和合规要求。他说，主要的强制性要求包括ISO 13485:2003关于工作环境的第6.4段:组织应确定和管理实现产品要求符合性所需的工作环境;美国FDA关于环境控制的质量体系法规21 CFR 820.70(c)规定:“……制造商应建立和维持适当控制这些环境条件的程序……”
然而，当调试洁净室时，没有硬性的规则可以遵循。Rose说:“有规范和期望，但由于每种产品都是不同的，公司需要对其产品和流程进行自己的风险分析，以确定最终产品对患者是无风险的。”
因此，最终灭菌的医疗器械没有具体的洁净室分类要求。然而，大多数学生都在七年级和八年级之间。(无菌产品确实有特定的要求，包括EN (ISO) 13824和EN 14160以及欧盟良好生产规范和ISO 14644-1)。
罗斯说，在决定建造哪种洁净室等级时，值得考虑的是7级和8级之间的成本差异并不是很大，因此许多公司选择7级作为额外的安全因素。
医疗设备制造商需要记住的概念是“设备灭菌的验证依赖于设备灭菌前的生物负荷，”Rose强调，这对所有灭菌技术都是正确的，但对辐照尤其如此。这意味着如果洁净室的生物负荷水平上升，那么之前进行的“灭菌验证”将不再有效。为了避免这种情况，“公司需要生物负荷控制的证明，这意味着他们需要常规的灭菌前生物数据，即来自关键控制点的产品生物负荷和房间环境数据。
他说:“一个常见的误解是，无尘室可以清洁东西，而实际上，无尘室的清洁程度只与引入其中的产品一样。”
为了保持洁净室的生物负荷水平，需要控制所有污染源(人、产品、包装和清洁材料)(见表1)。
| 表1:污染类型 | |||
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据估计，大约80%的污染(皮肤、头发和微生物)来自进入洁净室的人。人们越活跃，他们排出的污染就越多。为了限制这种情况，特工必须接受训练，行动缓慢，不能与房间另一边的其他特工交谈，也不能使用化妆品(包括指甲油和香水)。理想情况下，他们不应吸烟或患有呼吸道疾病或皮肤病。
除了所有必要的洗手训练和适当的工作服外，工作人员在上班时必须保持干净。经验表明，在进入工作场所之前进行的活动可能会影响生物负担的水平——例如，人们发现家里的墙纸是一个洁净室中孢子突然增加的原因。
对于医疗器械生产商来说，在产品灭菌之前进行生物负荷测试以验证灭菌效果也很重要。罗斯说:“如果产品被留在货架上，公司需要重新进行生物负荷测试，因为生物负荷可能在储存期间发生了变化。”
在与隐形敌人的战斗中失败的后果只有在该产品被患者使用或插入患者体内后才能看到，包括感染、过敏反应、中毒反应，甚至是纤维这种看似无害的物质造成的物理损伤，如果留在静脉注射的设备上，会剥离血管中的阀门。
内毒素
内毒素是经常被忽视的隐形敌人之一，内毒素是死亡的革兰氏阴性细菌的碎片，对人体有毒，可引起发烧或致命反应。罗斯强调，公司需要确定他们的设备是否携带内毒素。
鲎试剂为鲎试剂。它与细菌内毒素发生特异性反应，突出其存在。对于任何一种产品，如“无内毒素”或“非热原”，都必须进行测试以证明这一点。
内毒素和生物负担的一个常见来源是水，它可以携带革兰氏阴性细菌。因此，检查工艺用水是很重要的。内毒素可能来自供应链下游的水，例如挤压、研磨、铣削或清洗过程。
矛盾的是，内毒素是由细菌死亡产生的，这意味着消毒有时可以释放更多的内毒素。预防是控制它们的首选方法，特别是因为清除处理需要高温和强化学物质，这不适用于大多数塑料材料。
Rose说，我们的期望是，当公司测试生物负荷的设备时，相关的风险评估也应该包括是否有必要测试内毒素。但根据经验，“如果有水，我就会进行测试，”他说。
规定
BSI Healthcare微生物学团队负责人Stewart Brain进一步澄清了医疗设备的法规。他特别强调了医疗器械指令(MDD) 93/42/EEC基本要求8.5:“用于消毒的器械必须在适当控制的(例如环境)条件下制造”。
他还概述了国际标准ISO 14644 1-9中与洁净室相关的关键部分。他特别指出了第一部分的重要性，第一部分根据颗粒大小(空气中颗粒浓度限制)进行分类，第2部分详细说明了空气中颗粒浓度限制、气流量或气流速度、空气压差的测试频率。
第二部分还概述了监测制度应以风险评估为基础，并给出了重新认证的要求。
Brain从MDD中发现的关键问题是:
Brain还研究了澳大利亚和日本等其他国家的一些变化和额外要求。
最后，他强调了培训的重要性，不仅对经常使用和全职操作人员，而且对合同维护人员或可能不经常进入洁净室收集样品进行验证的质量人员也是如此。
专家组在Isotron研讨会上回答了代表们关于GMP的问题。从右至左:苏·芬利·伍兹，加里·沃德，拉斯·伯德(巴桑)和乔恩·查特斯(斯坦莫尔)
Isotron南马斯顿实验室的实验室经理苏·芬莱-伍兹(Su Finlay-Woods)研究了洁净室的概念和不同等级、不同的气流模式以及它们如何影响操作实践。她说:“由于大多数气流会把看不见的污染物从工作站引向下方的地板，所以一定要记住不要在地板上储存任何东西，因为那将是房间里最脏的地方。”同样重要的是，不要将设备或产品放置在可能堵塞通风口的地方，从而限制气流的有效性。
Finlay-Woods还做了一个有趣的类比，解释了为什么在洁净室穿着合适的长袍而不化妆是很重要的。她说，微生物倾向于漂浮在灰尘颗粒上，而不是单独漂浮，而小颗粒的灰尘形成了运输微生物的救生筏，而皮肤细胞则与邮轮上的化妆品粘在一起。
除了概述清洁和监测方法外，Finlay-Woods还强调了在标准操作规程中记录这些程序的重要性。
Isotron索恩实验室的实验室经理Gary Ward更深入地研究了环境监测程序，并再次强调了一个事实，即如果无法控制生物负荷，就无法控制产品的无菌保证水平(SAL)。
就标准及指引而言，环境监察的范围包括:
沃德研究了医疗设备和制药行业感兴趣的主要微生物污染物——细菌和真菌——以及如何使用主动空气采样、被动采样、沉降板和表面采样来监测水平。他还审查了生长介质的类型和孵化条件。
除了就设计监测方案提出建议外，沃德还概述了如何进行房间鉴定、收集数据，以及更重要的是如何处理数据。他说:“环境监测的目的是在产品面临风险之前纠正问题。”“因此，有必要定期对数据进行趋势分析”。
超出规格的结果
罗斯随后建议如何处理“不符合规格”的结果。他说，设定生物负荷限制有两个原因:
1)作为可接受和安全的水平，以及
2)作为正常范围的指标。
需要设置两种类型的限制:Alert限制和Action限制。标准操作规程应就违反这两项规定的常规反应提供指导。他说，概述必须采取的行动可以帮助运营商解决低水平的超出规格的事件，而不需要无根据的产品召回。
在设定限制时，重要的是，这些限制不仅对有关产品是安全的、可接受的，而且是现实的。花点时间来决定正确的限制，并在一年后重新审查，因为季节变化会影响结果。
“如果确实出现超出规格的结果，不要惊慌。首先控制问题，然后逻辑地考虑采取什么行动。”
罗斯建议公司要抵制没有充分理由就简单地重新测试的诱惑。“如果你这样做，你只会得到两种不同的结果。最好再做几次测试，如果五次测试中有三到四次不合格，那么你就知道你有问题了。”
当沉降板被放置时，记录房间里正在进行的活动是很有帮助的，因为任何超出规格的结果都可以与当时房间里发生的事情进行调查。
在寻找污染源时，寻找所发现的生物类型的变化，因为这可能会有所帮助。他说，这也值得与环境监测结果进行交叉对照。提出的问题包括:
石川图原理(鱼骨图)
许多公司忘记做产品影响评估。不合格的结果对产品有影响吗?可能是某些东西使产品超出了规范的正常范围，但产品仍然可能是安全的。罗斯建议进行内毒素测试。如果测试显示对产品没有影响，就没有必要拒收。
在最后的会议中，两位经验丰富的无尘室用户——Russ Bird，无尘室消耗品供应商Basan的总经理，和Jon Charters, Stanmore的QA/RA经理——提供了他们在建造或操作无尘室时的首要注意事项。
伯德强调了在建造之前进行良好设计的重要性。需要考虑的事情有:
查特斯解释了定制医疗植入物的供应商斯坦摩尔植入物公司如何利用Isotron的服务来帮助其进行日常监测计划。例如，它使用实际的组件作为样品，通过洁净室流程，然后将它们发送到Isotron进行生物负荷分析。它还每月采集水样，每月沉降和接触板计数(使用Isotron提供的板)，以及根据规定的协议从预先确定的监测地点进行的每季度颗粒计数。
该公司从Isotron收到一份报告，详细说明了各种样品的CFU水平。如果已经超过限制，公司也会在收到报告之前通过电话或电子邮件通知，以便采取行动。调查结果还会按月进行分析，以寻找趋势。通过这种方式，斯坦摩尔保持其洁净室在控制之下，符合法规，并有信心将患者的风险降至最低。
这一天为新人提供了基本知识，并提醒老手在无尘室操作中常见的错误。更重要的是，它提醒人们，人类是污染的主要肇事者，对所有进入污染控制环境的人来说，培训是关键。
