在考虑药品的监管和验证时，活性药物成分(API)的功效通常是主要关注的问题
确保这种化合物在正确的目标部位产生适当的作用是至关重要的。药品开发和生产的另一个监管要求是保证没有不适当的微生物能够在产品或其包装内存活。
抗菌防腐剂被添加到药品、医疗设备、个人护理产品、化妆品和食品中，以抑制在制造过程中或在使用多剂量容器的产品期间不经意引入的微生物的生长。
防腐剂功效测试(PET)——也称为抗菌效果测试——是为了确保防腐剂保持其抑制微生物的能力，这是英国药典(BP)、欧洲药典(Ph. Eur.)和美国药典(USP)标准所要求的。1、2
本文将解释PET对制造商的重要性，举例说明何时可能发生防止微生物生长的具体挑战，以及与威克姆实验室等检测机构合作如何使公司遵守国际法规。
限制各种产品中微生物的生长，有助于防止产品变质，并保护患者/使用者免受可能的感染。许多因素决定防腐剂的功效，包括产品的有效成分、加入防腐剂的配方或包装产品的容器/包装。
例如，用户将手指浸入罐中所含的局部面霜与直接应用于皮肤的管中所含的面霜的效果不同。如果任何成分发生变化，就有必要重新评估防腐剂将如何继续发挥作用。
PET方法相对简单:通过使用合适范围的微生物对制剂(尽可能在最终容器中)进行挑战来评估疗效。在规定的时间间隔内采集样本，并对幸存的生物体进行枚举。
如果在一定的时间范围内生物体的数量没有增加或有显著减少，则防腐性能是足够的。具体的标准取决于产品的类型。
所使用的挑战生物是广泛的微生物类型的代表，包括革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌、酵母和霉菌。BP / Ph值。欧元。和USP法规在某些药品制剂所需的试验生物方面略有不同(见表I)。
新产品制造后应尽快进行PET，以确保防腐剂与配方兼容。
建议在生产后进行第二次挑战测试，通常是几个月后，以确保防腐剂没有随着时间的推移而分解和失去效力。每当现有产品的配方、制造工艺或包装发生变化时，重新审视PET也是至关重要的，因为任何这些都会影响防腐剂的性能。
PET通常在专门的测试实验室进行，因为它们的独特设置和测试的手动要求。例如，维克汉姆实验室拥有进行大规模PET所需的空间，这涉及到在多个时间点进行多种生物挑战的大量培养皿。
PET可以与稳定性测试同时进行，它提供了必要的信息，以证明产品的功效在整个存储过程中持续。当样品在稳定性测试的特定时间点聚集时，也会进行PET以跟踪稳定性测试过程中防腐剂的作用。
一些公司倾向于他们的测试实验室使用环境分离物作为挑战生物。这些分离物可以从原材料、成品或生产设备表面回收。在这种情况下，没有标准协议中挑战生物的合格/不合格标准，但客户可以深入了解他们的产品在28天标准期间在制造套件中的表现。
BP / Ph值。欧元。USP方法要求在28天以内的不同时间点进行生物计数，间隔时间取决于产品制剂的类型。
当检测实验室从公司收到PET新样品时，必须在检测前进行方法适用性/验证。样本被有意地接种挑战生物，以检查是否有一个适合的恢复对照。
如果恢复不充分，PET就不能完成，因为没有办法判断有机体发生的事情是否源于防腐剂的作用。
在估计活菌数量之前，需要用不同的中和剂对测试溶液的抗菌特性进行中和;这确保了结果真实地反映了样品中存在的活微生物的数量。
验证可以通过化学抑制(首选方法)、过滤和洗涤、稀释或这些方法的组合来完成。中和剂必须有效地抑制抗菌素的作用而不对微生物有毒。可以使用不同的中和剂重复验证，以适应这种潜在的毒性(表II)。3.如果该方法仍然适用于该产品，则可以从以前的实验室进行方法转移。
某些因素会使PET的效果复杂化。多剂量容器中的止咳药是一个很好的例子，说明患者的依从性涉及防腐剂的功效。
建议使用测量勺来测量剂量;然而，许多人可能直接从瓶子里喝药物，因此可能会将有害的微生物引入产品，这可能会再次被使用。制造商在评估配方中的防腐剂成分并要求PET时应考虑这些因素。咳嗽药也提供了一个例子，说明包装的变化需要新的PET。最近产品包装的发展意味着一些制造商已经推出了适合儿童使用的多剂量注射器来注射糖浆，这种注射器可以插在瓶子的顶部，而不是依赖于将糖浆倒进勺子里。
这种包装和给药方法的改变保证了一种新的PET，特别是因为注射器在进入个人口腔后重新引入瓶子。防腐剂的要求可能会改变。
测试实验室面临着广泛的PET产品。例如，即使某种产品没有现行的标准，维克汉姆实验室等机构也能够利用以往的经验开发一种新的程序来确定防腐剂的功效。
食品、制药和化妆品公司正在不断修改和精简配方中的成分，以优化功效和成本。根据规定，每次防腐剂的含量都可能被重新评估，因此需要重新测试其抑制产品中微生物生长的能力，以达到令人满意的水平。
虽然英国、欧洲和美国药典对医药产品的PET有明确的要求，但对其他行业的规定不太明确。
欧盟立法推动在化妆品行业进行更多的PET, 2013年7月新的欧盟化妆品法规取代了化妆品指令，这表明仍有不断的改进需要进行。4
通过将PET产品送到经验丰富的测试实验室，制造商可以确信，几乎任何新产品或配方都将进行防腐功效测试，以确保其对消费者是安全的，并符合监管标准。研发部门一直在努力优化产品，随着配方和包装方面的新创新的发展，PET的要求将会发生变化，可能会变得更加复杂。
参考文献
